當液相色譜儀被污染之后，就會出現數據錯誤等問題。今天，我們就和大家一起探討一下，如何判斷液相色譜儀是否被污染以及系統 (HPLC) 中“攜帶污染”（或俗稱“殘留”）發(fā)生的原因和減少的方法。

柱壓變化影響較小，除非是檢測池太臟，堵塞嚴重，會對柱壓產生小于1000psi的影響（一般的用到光的檢測池也就耐這么高的壓力），但這種情況不會持續(xù)發(fā)生，給你排查的時間有限，堵的時間長了，會爆池，壓力也就沒有影響了。

峰面積應該是變小。檢測池臟時會有兩種情形影響檢測靈敏度。一方面是基線噪聲變大，從整體上影響信噪比。另一方面，檢測池臟了對于光檢測原理的檢測器來說（UV、PDA、DAD、FLD、ELSD）首先會減弱通過檢測池的光強度，光強度降低了，靈敏度就會下降，相當于檢測器光源的能量降低。

許多老式自動進樣器設計使用低壓進樣器，這些進樣器需要單獨的清洗瓶，因為它們不需要持續(xù)清洗。清洗瓶中應注入流動相或溶液，以溶解系統中可能殘留的任何物質。如果使用的是現代高壓“直通式 ”自動進樣器，則很少會出現攜帶污染問題，因為這些現代進樣器使用高壓泵將樣品吸入并直接注入流動流路，從而減少了對任何清洗階段的需求。

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注：對于多次穿刺的小瓶，必須更換隔膜或使用密封時間足夠長的隔膜材料，以減少這種影響。擦拭隔膜針可消除部分污染。這個問題會造成兩種污染。(a)當針頭浸入同樣有一個大隔膜開口的樣品瓶（相同或不同的樣品瓶）時，針頭會帶著一些樣品沉積到新的樣品瓶（或樣品瓶的隔膜上）。(b)污染物還可能順著針頭本身流下，在進樣時滴到針座上，造成針座或樣本污染。

減少針頭外部污染的最簡單的解決方案之一，就是在洗瓶中加入一種溶液，這種溶液經過優(yōu)化，可以快速將樣品溶解到溶液中。這聽起來很簡單，但許多色譜分析人員選擇的清洗液根本無法提高洗針的清潔度。例如肽、蛋白質、脂肪、油類和/或脂類等樣品可能很麻煩，因為它們的溶解性可能與所選的流動相不符；流動相通常是理想的，但在某些情況下卻不起作用。這些清洗瓶必須經常更換（只需在系統中設置多個清洗瓶位置即可）。此外，每次使用清洗瓶時都應將瓶蓋關閉，以減少吸取污染（此步驟至關重要）。

大多數自動進樣器閥門，依靠旋轉密封將樣品從針環(huán)路轉移到系統的流路中。這些閥門內的部件會磨損，應至少每6個月檢查一次，必要時更換。此外，還應經常檢查針座和針是否有磨損或泄漏的跡象。

注：查看進樣器是否有泄漏跡象。泄漏總是表明存在問題，應立即解決。有泄漏時不要進行進樣。您的方法和獲得的數據將無效。應更換任何磨損的部件并測試系統性能。造成樣品攜帶污染的最常見原因之一是：樣品注入閥旋轉密封磨損。磨損的密封件會使樣品在兩次進樣之間滯留在其空間和凹槽中，導致在隨后的分析中出現樣品色譜峰。此外，緩沖鹽也會滯留在密封件之間，造成泄漏或攜帶污染。例行的 HPLC 維護以及每天沖洗所有緩沖液/鹽（如適用）可消除這些問題。

良好的色譜分析需要全面了解所使用的硬件和HPLC的基本原理。您必須能夠對系統的完整流路和方法開發(fā)中使用的色譜概念進行故障排除，通過指導，采用合理的步驟來學習。